濒危藏药桃儿七ISSR-PCR反应体系的建立与优化

编号 zgly0001566300

文献类型 期刊论文

文献题名 濒危藏药桃儿七ISSR-PCR反应体系的建立与优化

作者 张盾  任梦云  关潇  张银东 

作者单位 海南大学热带农林学院  中国环境科学研究院 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2017年04期

年份 2017 

分类号 S567.239 

关键词 桃儿七  ISSR-PCR  正交试验  单因素试验 

文摘内容 为通过ISSR分子标记研究桃儿七遗传多样性,建立并优化桃儿七的ISSR-PCR反应体系。使用正交设计辅以单因素试验,对桃儿七ISSR-PCR反应体系中的5种主要因素(模板DNA,Mg2+,Taq DNA酶,d NTPs及ISSR引物)进行筛选优化,选取甘肃碌曲县西仓神山山顶桃儿七居群样本验证该反应体系。正交试验各因素显著性为引物>Taq DNA酶>DNA浓度>dNTPs>Mg2+,桃儿七ISSR-PCR反应的最佳体系为（25μL）:2.5 mmol/L Mg2+,0.2 mol/L dNTP,0.4μmol/L引物,0.5 U Taq DNA酶,40 ng DNA,2.5μL 10×Buffer。该体系具有高稳定性,多态性丰富的特点,为野生桃儿七遗传多样性及保护策略研究提供了技术支持。