桑树景天庚酮糖-1,7-二磷酸酶基因的克隆、原核表达与植物表达载体的构建

编号 zgly0000554471

文献类型 期刊论文

文献题名 桑树景天庚酮糖-1,7-二磷酸酶基因的克隆、原核表达与植物表达载体的构建

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 冀宪领  盖英萍  马建平  牟志美 

作者单位 山东农业大学林学院  山东农业大学生命科学学院 

母体文献 林业科学 

年卷期 2008,44(3)

页码 62-69

年份 2008 

分类号 S718.46  Q943.2 

关键词 桑树  基因克隆  原核表达  植物表达载体  景天庚酮糖-1  7-二磷酸酶 

文摘内容 景天庚酮糖-1,7-二磷酸酶(SBPase)是卡尔文循环过程中的关键酶。利用RACE技术得到景天庚酮糖-1,7-二磷酸酶基因全长cDNA,命名为MSBPase(GenBank登录号：DQ995346)。MSBPase全长为1527bp,该序列含有1个1179bp的完整开放读码框,编码393个氨基酸,蛋白质理论分子质量约为42.6ku,等电点为5.85,其氨基酸序列与其他植物中已分离的SBPase有很高的同源性。对MSBPase编码的蛋白质(命名为MSBPase)进行结构预测分析表明,该蛋白富含无规卷曲(coil),高达64.29%,其次是α-螺旋(helix),为22.19%,而β-折叠(strand)只有13.52%。将MSBPase编码区插入原核表达载体pET30a(＋),并转化到大肠杆菌菌株BL21中,经过IPTG诱导,MSBPase融合蛋白在BL21菌株中成功表达。将得到的MSBPase编码区插入植物表达载体pBI121中,构建了MSBPase植物表达载体pBI121-SBP。