家蚕凋亡蛋白抑制因子(BmIAP)基因真核表达与功能分析

编号 zgly0001540989

文献类型 期刊论文

文献题名 家蚕凋亡蛋白抑制因子(BmIAP)基因真核表达与功能分析

作者 易华山  马鲜平  潘敏慧  鲁成 

作者单位 西南大学荣昌校区动物医学系  家蚕基因组生物学国家重点实验室 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2017年01期

年份 2017 

分类号 Q78  S881.2 

关键词 家蚕  细胞凋亡  凋亡蛋白抑制因子  真核表达  瞬时表达 

文摘内容 【目的】家蚕Bombyx mori凋亡蛋白抑制因子(BmIAP)是在家蚕中发现的一个凋亡蛋白抑制因子(IAP)。本研究旨在验证家蚕BmIAP蛋白在家蚕细胞内的功能特征,以进一步研究BmIAP在家蚕细胞凋亡中的作用。【方法】对构建的瞬时表达载体PIZ/V5-BmIAP-dsRed,应用脂质体转染家蚕Bm N-SWU1细胞;应用实时荧光定量PCR和Western blot分析BmIAP mRNA及蛋白表达水平;通过150 ng/m L放线菌素D诱导家蚕Bm N-SWU1细胞12,18和24 h,应用免疫荧光及实时荧光定量PCR方法,分析BmIAP瞬时表达与细胞凋亡的关系。【结果】构建的瞬时表达载体PIZ/V5-BmIAP-dsRed能在家蚕Bm N-SWU1细胞表达BmIAP蛋白,其BmIAP mRNA表达水平上调近45倍,融合蛋白约为60 k D;BmIAP基因瞬时表达72 h后,BmIAP能显著抑制放线菌素D诱导12 h时的家蚕Bm N-SWU1细胞凋亡。【结论】BmIAP蛋白在家蚕细胞中能抑制家蚕细胞凋亡,是家蚕的一种凋亡蛋白抑制因子。