家蚕溶茧酶基因的真核表达及其产物的生物活性检测

编号 zgly0001338789

文献类型 期刊论文

文献题名 家蚕溶茧酶基因的真核表达及其产物的生物活性检测

作者 吴玉丹  李兵  王文兵  王东  沈卫德 

作者单位 苏州大学生命科学学院  江苏大学生命科学研究院  苏州大学生命科学学院 江苏苏州215123  江苏苏州215123苏州大学蚕桑研究所  江苏苏州215123  江苏镇江212013 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2008年05期

年份 2008 

分类号 Q78  Q96 

关键词 家蚕  溶茧酶基因  真核表达  杆状病毒系统  Bac-to-Bac系统 

文摘内容 为了研究家蚕Bombyxmori溶茧酶基因(cocoonae)真核表达及其产物的生物活性,将溶茧酶基因(GenBank登录号EF428980)克隆至杆状病毒转移载体pFastBacTM1中获得pFast-cocoonase,将其转化DH10Bac感受态细胞后,PCR方法检测证实所分离的重组病毒DNA中含有目的片段溶茧酶基因。用脂质体法转染家蚕BmN细胞,获得重组病毒。SDS-PAGE分析显示,感染重组杆状病毒Bac-cocoonase的细胞表达产物在约为27.6kD处出现特异性条带,这与预测的蛋白大小相符。用该表达产物与茧丝反应后,电镜下观察茧丝的形态,结果表明表达产物对茧丝的丝胶层有一定的水解作用。