编号 zgly0001705863
文献类型 期刊论文
文献题名 6种核酸提取试剂盒的布鲁氏菌核酸提取效率比较
作者 董浩 韩焘 毕一鸣 原霖 彭小薇 蒋卉 冯宇 吴同垒 秦玉明 王传彬
作者单位 中国动物疫病预防控制中心 中国兽医药品监察所 河北科技师范学院
母体文献 中国动物检疫
年卷期 2020年06期
年份 2020
分类号 S852.61
关键词 布鲁氏菌 核酸提取 试剂盒比较
文摘内容 为比较不同类型核酸提取试剂盒的布鲁氏菌核酸提取效率,选取6种核酸提取试剂盒(磁珠法、柱式法各3种),分别对布鲁氏菌灭活菌液和16份临床组织样品进行核酸提取,使用荧光定量PCR方法评估提取效率。结果显示:6种试剂盒在提取10~2和10~4稀释度的布鲁氏菌灭活菌液核酸时,磁珠法的提取产物荧光定量PCR的Ct值整体低于柱式法,批内变异系数小于5%;提取临床组织样品时,2种柱式法细菌提取试剂盒能够提取全部样品的核酸,2种磁珠法细菌提取试剂盒提取了14份核酸,剩下的1种磁珠法和1种柱式法病毒提取试剂盒分别提取了12份和3份核酸。结果表明:6种试剂盒均能有效提取布鲁氏菌灭活菌液,其中磁珠法提取效率略高于柱式法;柱式法细菌DNA对临床组织样品的提取效率略高于磁珠法细菌DNA,但磁珠法和柱式法的病毒DNA提取试剂盒均不适用于临床组织样品的布鲁氏菌核酸提取。在实际操作中,应根据实验室条件、样品数量和任务紧迫性等因素,选取应用合适的试剂盒。本研究为布鲁氏菌核酸提取方法的选择提供了参考。