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单重PCR鉴别犬4种布鲁氏菌检测方法的建立



编号 zgly0001720843

文献类型 期刊论文

文献题名 单重PCR鉴别犬4种布鲁氏菌检测方法的建立

作者 徐怀英  黄迪海  仉伟  郝文娟  盛晓丹  秦卓明 

作者单位 山东省农业科学院家禽研究所  山东省健牧生物药业有限公司  济南市动物生物药品工程技术研究中心  济南市动物园服务中心 

母体文献 中国动物检疫 

年卷期 2020年11期

年份 2020 

分类号 S852.61 

关键词 布鲁氏菌  犬  单重PCR  实验室检测 

文摘内容 为建立适合犬布鲁氏菌病临床检测的单重PCR方法,通过对比粗糙型(犬种)与光滑型(羊种、牛种和猪种)布鲁氏菌基因组DNA的序列差异,设计1对引物并优化反应条件,建立了可初步鉴别犬4种布鲁氏菌的PCR方法,然后对该方法的特异性和灵敏度进行评价,并对20份犬布鲁氏菌血清学阳性的血液样品进行临床检测。结果显示,利用建立的PCR反应体系对牛种、羊种和猪种布鲁氏菌均能扩增出717 bp的目的条带,对犬种布鲁氏菌能扩增出366 bp的目的条带;最低可检测到犬种、羊种、猪种和牛种布鲁氏菌基因组DNA浓度分别为5.07×10-2、6.20×10-2、7.80×10-3和5.50×10-2 ng/μL;20份血液样品中共检测到3份犬种布鲁氏菌阳性样品,与使用GB/T 18646—2018引物的PCR检测结果一致。结果表明,本试验建立的单重PCR方法简捷、特异、敏感,适合基层兽医实验室对犬布鲁氏菌病的检测与鉴定。

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