PCV-2 ORF2和PRRSV GP5双基因共表达重组腺病毒的构建及小鼠免疫试验

编号 zgly0001448890

文献类型 期刊论文

文献题名 PCV-2 ORF2和PRRSV GP5双基因共表达重组腺病毒的构建及小鼠免疫试验

作者 林初文 

作者单位 山东省滨州畜牧兽医研究院 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2013年04期

年份 2013 

分类号 S852.659.6 

关键词 猪繁殖与呼吸综合征病毒  猪圆环病毒2型  重组腺病毒  免疫应答 

文摘内容 为构建猪圆环病毒2型(PCV-2)ORF2和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5双基因共表达重组腺病毒,将扩增的ORF2基因和GP5基因通过IRES元件串联,构建重组腺病毒穿梭质粒。然后用PmeⅠ酶切穿梭质粒,使其线性化,将线性化质粒转化pAdeasy-1的BJ5183感受态细胞,同源重组后筛选重组腺病毒质粒,经PacⅠ酶切后转染293A细胞进行包装,获得重组腺病毒。PCR鉴定表明重组腺病毒含有ORF2和GP5基因,Western blot检测结果表明ORF2基因和GP5基因在293A细胞内获得表达。重组腺病毒经293A细胞连续传30代,TCID50稳定为10-9.0/mL。初步动物免疫试验结果表明,该重组腺病毒能够刺激机体分别产生PCV-2和PRRSV的特异性抗体免疫应答反应。该重组腺病毒可以作为PCV-2与PRRSV二联基因工程疫苗研究的候选毒株。