利用Cre/loxp定位重组系统构建雄性不育基因和恢复基因表达载体

编号 zgly0000353748

文献类型 期刊论文

文献题名 利用Cre/loxp定位重组系统构建雄性不育基因和恢复基因表达载体

作者 宋洪元  曹必好  丁建刚  雷建军  宋明 

作者单位 西南农业大学园艺园林学院  华南农业大学园艺系 

母体文献 农业生物技术学报 

年卷期 2004,12(4)

页码 396-400

年份 2004 

分类号 Q782  S565.4 

关键词 基因表达载体  雄性不育基因  系统构建  定位  除草剂Basta  Nos终止子  Cre/lox  肌动蛋白  植物表达载体  基因表达盒  Cre基因  DNA扩增  PCR方法  启动子  杂种一代  重组系统  克隆载体  克隆测序  恢复基因  插入  反义  位点  n基因  筛选剂 

文摘内容 结合Cre/lox定位重组系统和杂种一代的育种特点, 构建了反义肌动蛋白雄性不育基因表达载体pCABARTAAct和相应的恢复基因表达载体pBINPLUSCre。将位于质粒pSTAAct中的反义肌动蛋白雄性不育基因表达盒(含TA29启动子、反向插入TA29启动子下游的Actin基因及Nos终止子)切下插入中间克隆载体pGloxp两个同向lox位点之间, 再将上述表达盒连同lox位点切下插入pcAMBar, 获得以除草剂Basta为筛选剂的反义肌动蛋白雄性不育基因表达载体pcABARTAAct。PCR方法从溶原菌BM25.8基因组DNA扩增出Cre基因, 克隆测序验证无误后插入PBl525 CaMV35S-35S双启动子和Nos终止子之间, 再将表达盒切下插入pBINPLUS质粒相应位点, 得到恢复基因植物表达载体pBINPLUSCre。