编号 zgly0000353748
文献类型 期刊论文
文献题名 利用Cre/loxp定位重组系统构建雄性不育基因和恢复基因表达载体
作者单位 西南农业大学园艺园林学院 华南农业大学园艺系
母体文献 农业生物技术学报
年卷期 2004,12(4)
页码 396-400
年份 2004
分类号 Q782 S565.4
关键词 基因表达载体 雄性不育基因 系统构建 定位 除草剂Basta Nos终止子 Cre/lox 肌动蛋白 植物表达载体 基因表达盒 Cre基因 DNA扩增 PCR方法 启动子 杂种一代 重组系统 克隆载体 克隆测序 恢复基因 插入 反义 位点 n基因 筛选剂
文摘内容 结合Cre/lox定位重组系统和杂种一代的育种特点, 构建了反义肌动蛋白雄性不育基因表达载体pCABARTAAct和相应的恢复基因表达载体pBINPLUSCre。将位于质粒pSTAAct中的反义肌动蛋白雄性不育基因表达盒(含TA29启动子、反向插入TA29启动子下游的Actin基因及Nos终止子)切下插入中间克隆载体pGloxp两个同向lox位点之间, 再将上述表达盒连同lox位点切下插入pcAMBar, 获得以除草剂Basta为筛选剂的反义肌动蛋白雄性不育基因表达载体pcABARTAAct。PCR方法从溶原菌BM25.8基因组DNA扩增出Cre基因, 克隆测序验证无误后插入PBl525 CaMV35S-35S双启动子和Nos终止子之间, 再将表达盒切下插入pBINPLUS质粒相应位点, 得到恢复基因植物表达载体pBINPLUSCre。