象草4CL基因片段的克隆及RNAi表达载体构建

编号 zgly0001625305

文献类型 期刊论文

文献题名 象草4CL基因片段的克隆及RNAi表达载体构建

作者 霍松  陈慧  朱琼华  解新明 

作者单位 华南农业大学农学院 

母体文献 草业学报 

年卷期 2012年01期

年份 2012 

分类号 S543.9  S561 

关键词 象草  Gateway技术  4CL基因  RNAi  载体构建 

文摘内容 象草是热带和亚热带地区广泛栽培的多年生资源植物。为探讨华南象草4-香豆酸:CoA连接酶(4CL)基因下调表达对木质素合成的影响,本研究设计1对特异引物,PCR扩增获得一段长为374bp的干扰片段。通过TO-PO克隆,将该片段克隆到载体pCR/GW/TOPO,构建了入门克隆载体pENTR-4CL;再经过LR反应使pE-NTR-4CL上的干扰片段进入目的载体pCB2004B上,形成表达载体pCB2004B-4CL,最后通过冻融法将其转入到根癌农杆菌EHA105中。菌液PCR结果表明RNAi质粒已成功转入农杆菌,为进一步利用RNAi技术研究4CL基因的功能奠定了基础。