蝶蛹金小蜂卵黄蛋白单克隆抗体的制备及其应用方法的建立

编号 zgly0000522046

文献类型 期刊论文

文献题名 蝶蛹金小蜂卵黄蛋白单克隆抗体的制备及其应用方法的建立

学科分类 220.3020;森林昆虫学

作者 董胜张  高秀云  程正贤  胡萃  叶恭银 

作者单位 浙江大学昆虫科学研究所  浙江大学生物技术研究所 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2007,50(9)

页码 871-877

年份 2007 

分类号 Q965 

关键词 蝶蛹金小蜂  卵黄蛋白  单克隆抗体  双夹心ELISA 

文摘内容 为深入研究寄生蜂卵黄发生及其内分泌调控，特采用杂交瘤细胞技术，制备4株能稳定分泌抗蝶蛹金小蜂Pteromalus puparum卵黄蛋白(vitellin，Vt)的单克隆抗体(mAb)，即PpVtmAb1，PpVtmAb2，PpVtmAb3和PpVtmAb4。这4株单克隆抗体的重链和轻链的亚类均分别为IgG1和κ类型，不仅特异性识别Vt，而且识别雌蜂血淋巴中卵黄原蛋白(viteUogenin，Vg)，但与雄蜂体液无反应。通过比较4种不同的ELISA方法，确定了微量检测蝶蛹金小蜂体内Vg／Vt的最适ELISA法，即双夹心ELISA法。该方法可用于单头雌蜂体内Vg／Vt的检测，其检测灵敏度为20ng／mL。用Western免疫印迹的方法证实了该蜂Vg的合成始于刚羽化的成虫，并在羽化后12～36h内含量达到高峰。