长角血蜱卵黄蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

编号 zgly0001338822

文献类型 期刊论文

文献题名 长角血蜱卵黄蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

作者 李晓明  张志平  杨小龙  王多  刘敬泽 

作者单位 河北师范大学生命科学学院 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2008年10期

年份 2008 

分类号 R392  S852.7 

关键词 长角血蜱  卵黄蛋白  单克隆抗体  分子特性  亚基鉴定 

文摘内容 为研究蜱类的卵黄发生及其机理,用长角血蜱Haemaphysalis longicornis卵黄蛋白(vitellin,Vn)免疫BALB/c小鼠,取免疫鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,经3次克隆化筛选,获得6株能稳定分泌抗Vn的单克隆抗体(McAb),即1B5,2A7,2B8,2F2,3A1和3G1。1B5,2B8和2F2亚型为IgGA;2A7亚型为IgG1;3A1和3G1亚型为IgG2a。6株McAb均具有高度特异性,效价在1∶105以上。选取效价和特异性最好的1株抗体1B5进行SDS-PAGE分析和亲和力测定,测得1B5重链和轻链的分子量分别为58kD和21kD,亲和常数为2.8993×10-6。Western免疫印迹分析发现6株单抗均与Vn的8个亚基发生免疫反应。本研究成功制备了6株抗长角血蜱Vn的单克隆抗体,为深入阐明长角血蜱卵黄发生的过程与调控机理提供了重要的工具。