苦楝RAPD反应体系的优化

编号 zgly0000556845

文献类型 期刊论文

文献题名 苦楝RAPD反应体系的优化

作者 陈羡德  陈礼光  陈珺  罗增炎  张志欣  郑郁善 

作者单位 福建农林大学林学院  漳州师范学院生物系  连城县林业局 

母体文献 西南林学院学报 

年卷期 2008,28(1)

页码 43-47

年份 2008 

分类号 Q75  S792.33 

关键词 苦楝  RAPD反应  体系优化 

文摘内容 以苦楝叶片提取的基因组DNA为材料,通过单因素多水平梯度试验,筛选DNA模板,Mg^2＋,Taq DNA聚合酶,dNTPs和随机引物的浓度及用量,建立苦楝RAPD技术分析体系.结果表明：当基因组DNA浓度为60 ng/μL,镁离子浓度为3.0 mmol/L,dNTP浓度为0.25 mmol/L,引物浓度为0.30μmol/L,Taq DNA聚合酶用量为1 U/20μL,反应体系总体积20μL时,出现可辨认的清晰谱带.其扩增程序为：94℃预变性2 m in;然后38个循环(94℃变性30 s,37℃退火1 min,72℃延伸80 s);最后72℃延伸8 min,4℃保存。