鲑鱼甲病毒逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法研究

编号 zgly0001655673

文献类型 期刊论文

文献题名 鲑鱼甲病毒逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法研究

作者 刘艳华  任彤  谈艳苗  张利峰 

作者单位 北京出入境检验检疫局检验检疫技术中心 

母体文献 中国动物检疫 

年卷期 2018年10期

年份 2018 

分类号 S941.41 

关键词 鲑鱼甲病毒  逆转录环介导等温扩增检测方法  检测限  特异性 

文摘内容 鲑鱼甲病毒(Salmonid alphavirus,SAV)是鲑鱼胰脏病(Salmon pancreas disease,PD)病原,主要感染鲑科鱼类,目前在我国尚未分离到。为提高出入境鱼类中的SAV检测效率,根据SAV nsP1基因片段,设计3对特异性引物,建立了检测SAV的逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法。该方法使用25μL反应体系,经优化后的反应温度为65℃,反应时间为1 h,检测限可达10个拷贝数的病毒核酸,且不与传染性鲑鱼贫血病毒、病毒性出血性败血症病毒、传染性造血器官坏死病毒、病毒性神经坏死病病毒、草鱼呼肠孤病毒和鲤春病毒血症病毒的RNA产生交叉反应。在反应体系中加入染料后,反应结果肉眼直接可见。本研究建立的RTLAMP方法是一种特异性强、方便快捷的SAV检测方法,适合SAV的现场初筛和核酸检测。