华中五味子ISSR-PCR反应体系优化及引物筛选

编号 zgly0001392102

文献类型 期刊论文

文献题名 华中五味子ISSR-PCR反应体系优化及引物筛选

作者 罗成  熊宇婷  顾蔚  王喆之 

作者单位 陕西师范大学生命科学学院  陕西师范大学药用资源与天然药物化学教育部重点实验室  西北濒危药材资源开发国家工程实验室 

母体文献 植物研究 

年卷期 2010年05期

年份 2010 

分类号 S567.19 

关键词 华中五味子  ISSR  体系优化  引物筛选 

文摘内容 系统研究了华中五味子ISSR-PCR反应体系中的主要影响因子,确立华中五味子ISSR-PCR最适反应体系,并筛选出12条有效引物。单因子实验结果显示,华中五味子ISSR-PCR反应体系中各主要成分的适宜浓度范围为,Mg2+1.50~3.50 mmol.L-1,dNTPs 0.10~0.35 mmol.L-1,引物0.25~0.60μmol.L-1,Taq酶0.50~1.50U。4因子3水平正交实验确立了最适反应体系,即20μL体系中包含2.50 mmol.L-1Mg2+、0.20 mmol.L-1dNTPs、0.25μmol.L-1引物、1.50 UTaq酶、60 ng DNA模板、2.50μL 10×PCR Buffer。本研究为华中五味子种质资源的评估及遗传多样性分析奠定基础。