小鼠生殖细胞特异基因Oct4启动子片段克隆及报告载体构建

编号 zgly0000702588

文献类型 期刊论文

文献题名 小鼠生殖细胞特异基因Oct4启动子片段克隆及报告载体构建

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 刘文强  曹晖  殷吉庆  云彦  华进联  雷安民 

作者单位 西北农林科技大学动物医学院 

母体文献 农业生物技术学报 

年卷期 2010(1)

页码 61-65

年份 2010 

分类号 Q954.4 

关键词 Oct4  生殖细胞  转染 

文摘内容 本研究通过PCR方法从小鼠(Mus musculus)基因组中扩增出Oct4启动子的CR4区和CR1区,将其克隆到真核报告载体pEGFP-1,构建了携带Oct4启动子片段的小鼠生殖细胞特异性报告载体CR1,4-pEGFP-1。用该载体转染多种细胞,在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(EGFP)在细胞中的表达情况,同时以半定量RT-PCR检测转染细胞中Oct4及其它生殖细胞特异性基因的转录情况。结果显示,GFP在小鼠胚胎干细胞、小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)和C2C12细胞中均不表达,而在P19细胞和睾丸细胞中表达。RT-PCR结果显示,Oct4在P19、睾丸细胞和生殖干细胞中特异性转录。这表明所构建的绿色荧光蛋白报告载体只在生殖细胞和多能生殖干细胞中内表达,该质粒可作为示踪生殖细胞的工具,同时也可以作为生殖干细胞多能性状态的一个监测标记。