苹果叶片叶绿体分离及其蛋白提取、双向电泳方法的优化

编号 zgly0001523633

文献类型 期刊论文

文献题名 苹果叶片叶绿体分离及其蛋白提取、双向电泳方法的优化

作者 肖龙  张彩霞  张利义  田义  宗泽冉  丛佩华 

作者单位 农业部园艺作物种质资源利用重点实验室  中国农业科学院果树研究所 

母体文献 果树学报 

年卷期 2016年06期

年份 2016 

分类号 S661.1 

关键词 苹果  叶片  叶绿体蛋白  提取方法  双向电泳 

文摘内容 【目的】筛选苹果叶片叶绿体及其蛋白的提取方法,建立叶绿体蛋白双向电泳分离技术体系。【方法】以苹果叶片为试材,采用4种Percoll密度梯度离心法提取苹果叶片叶绿体,检测提取叶绿体的完整度、纯度及提取率。采用酚抽提法、改良酚抽提法提取叶绿体蛋白,检测蛋白样品的质量。优化胶条长度、上样量、等电聚焦程序、分离胶浓度等双向电泳条件。【结果】Percoll密度梯度离心法D提取的叶绿体纯度高、提取率高,优于其他3种方法;改良酚抽提法提取的叶绿体蛋白,经2-DE分离所得蛋白点数多、分离效果好,优于酚抽提法。蛋白样品经优化后的双向电泳体系分离,获得了较为理想的2-DE图谱。【结论】Percoll密度梯度离心法D、改良酚提法适于苹果叶片叶绿体及其蛋白的提取。苹果叶片叶绿体蛋白使用优化后的双向电泳体系进行分离,可以获得比较理想的2-DE图谱。