一种快速高效制备家蚕微孢子虫基因组DNA和总蛋白的方法

编号 zgly0001399781

文献类型 期刊论文

文献题名 一种快速高效制备家蚕微孢子虫基因组DNA和总蛋白的方法

作者 蔡顺风  何欣怡  何祥康  邱海洪  李光才  何永强  鲁兴萌 

作者单位 浙江大学蚕蜂研究所  浙江出入境检验检疫局技术中心 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2011年06期

年份 2011 

分类号 S884 

关键词 家蚕微孢子虫  核酸  蛋白  提取方法  珠磨式研磨器  双向电泳 

文摘内容 家蚕微孢子虫孢子壁坚厚不易破碎,并对许多化学物质有很强的抵抗性,使用常规的核酸和蛋白抽提方法效果不够理想。研究建立玻璃珠破碎法快速制备家蚕微孢子虫基因组DNA和总蛋白的方法,采用琼脂糖凝胶电泳和SDS-PAGE分析所得DNA的完整性和所得总蛋白的差异性,并对提取蛋白进行双向电泳试验。结果表明:使用玻璃珠破碎法对微孢子虫孢子壁的破碎率可达到90%以上,基因组DNA得率约为7.65 fg/粒,总蛋白得率约为788.3 fg/粒,均显著高于常用的发芽法和液氮冻融研磨法的得率。双向电泳结果显示玻璃珠破碎法能有效提取家蚕微孢子虫总蛋白,经考马斯亮蓝染色可检测到约350个蛋白点,蛋白信息丰富,可进一步用于质谱分析。