土壤微生物总DNA的提取以及土壤真菌ITS—PCR体系的建立

编号 zgly0000772987

文献类型 期刊论文

文献题名 土壤微生物总DNA的提取以及土壤真菌ITS—PCR体系的建立

学科分类 220.1040;森林土壤学

作者 隋心  冯富娟  娄鑫  韩士杰 

作者单位 中国科学院沈阳应用生态研究所  东北林业大学生命科学学院 

母体文献 中国酿造 

年卷期 2011(9)

页码 166-169

年份 2011 

分类号 Q938.1 

关键词 DNA提取  ITS-PCR  土壤微生物  单因子试验 

文摘内容 18SrDNA及28srDNA间的rDNA内转录间隔区(intemal transcribed spacer, ITS)序列已广泛运用剑多种真菌种属水平的分类鉴定研究中, 利用Tiangen DP330i壤提取试剂盒对土壤总DNA进行提取并对真菌的ITS—PCR体系进行优化。研究发现: 样品在-20℃低温下短期保存对DNA的提取质量无明显影响。对土壤真菌ITS—PCR扩增条件中的各个因素进行了优化, 建立了引物浓度0.5μmol/L、dNTP浓度为0.2mmol/L、Taq酶的用量2.5U、DNA模板用量为30ng-90ng的最佳ITS—PCR扩增体系。