几种苎麻园土壤微生物总DNA提取方法比较

编号 zgly0000698110

文献类型 期刊论文

文献题名 几种苎麻园土壤微生物总DNA提取方法比较

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 陈杨栋  陈婷  李力炯  曹张军  张兴群 

作者单位 东华大学生态纺织教育部重点实验室  东华大学化学化工与生物工程学院 

母体文献 实验室研究与探索 

年卷期 2010(4)

年份 2010 

分类号 S154.3 

关键词 土壤微生物  基因组DNA  DNA提取 

文摘内容 实验设计对比了苎麻园土壤微生物总DNA6种提取方法。方法Ⅰ采用裂解酶、蛋白酶K、SDS与CTAB处理;方法Ⅱ结合利用CTAB、SDS、LDS和BME;方法Ⅲ综合采用玻璃珠、CTAB和SDS法;方法IV结合利用SDS-GITC-PEG;方法V利用尿素、SDS、LDS和BME综合处理;方法VI则利用试剂盒处理土壤。6种方法都可以提取到23kb左右的DNA片段,经过TENP和PVPP方法预处理的土壤样品,能有效去除腐殖酸等污染物,且提取得到的土壤总DNA完整性好、纯度高,不需要纯化就可用于PCR扩增。但不同方法取得的DNA的片段长度、产量和纯度存在明显差异。通过比较,改进并建立了可用于宏基因组构建的高纯度、大片段DNA的方法。