早熟禾ISSR反应体系的优化

编号 zgly0001362123

文献类型 期刊论文

文献题名 早熟禾ISSR反应体系的优化

作者 刘美  赵桂琴  刘欢  张婷婷  尹国丽 

作者单位 甘肃农业大学草业学院 

母体文献 中国草地学报 

年卷期 2009年05期

年份 2009 

分类号 S688.4 

关键词 早熟禾  ISSR  正交优化 

文摘内容 以早熟禾基因组DNA为模板,利用正交设计,对影响ISSR反应体系的主要因素(Mg2+、dNTP、Taq酶)从4个水平上进行筛选和优化,建立了适合早熟禾的最佳ISSR反应体系:25μl反应体系中1.25U Taq酶、1.5mmol/L Mg2+,10×PCR Buffer 2.5μl、0.4 mmol/L dNTP、1μl引物、1μl DNA模板。扩增程序为:94℃预变性3min;94℃变性30s,56.4℃退火30s,72℃延伸1min,循环35次;72℃延伸7min,4℃保存。在此反应体系下,可以得到重复性好、稳定且多态性高的条带。