根瘤菌RAPD引物筛选及条件优化

编号 zgly0000503740

文献类型 期刊论文

文献题名 根瘤菌RAPD引物筛选及条件优化

学科分类 220.3020;森林昆虫学

作者 何庆元  玉永雄  王松华  柯亚珍  张晓红 

作者单位 安徽科技学院生命科学学院  西南农业大学牧草与草食家畜重点实验室 

母体文献 核农学报 

年卷期 2007,21(2)

页码 132-135

年份 2007 

分类号 Q965 

关键词 根瘤菌  RAPD  正交设计  条件优化 

文摘内容 用改良的SDS-CTAB酶裂解法提取了根瘤菌基因组DNA的模板, 从100个10bp的随机引物中筛选出了16条在20个菌株上均能扩增出清晰的片段。应用L16(4 ^5)正交表研究了DNA模板、Mg^2+、Taq酶、dNTPs和引物浓度对扩增迁移率重现性的影响, 用这种方法建立的根瘤菌RAPD-PCR优化反应体系为: 20μl体系中含2.5mg/L的DNA模板、2.00mmol/L的Mg^2+、1.00U的Taq酶、0.05mmol/L dNTPs、0.35μmol/L随机引物。