霸王基因组RAPD优化条件的建立

编号 zgly0000475017

文献类型 期刊论文

文献题名 霸王基因组RAPD优化条件的建立

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 郝瑞文  景建洲  李振勇  贾敬芬 

作者单位 西北大学生命科学学院  华美生物工程公司博士后工作站 

母体文献 中国沙漠 

年卷期 2006,26(2)

页码 286-290

年份 2006 

分类号 Q943.2 

关键词 霸王  RAPD  PCR  条件优化 

文摘内容 实验以霸王20d龄无菌籽苗为材料, 使用CTAB法提取其基因组DNA, 进行RAPD条件优化分析。通过单因子实验分别研究了Mg^2+浓度、dNTPs浓度、Taq酶的浓度、引物浓度和模板DNA浓度对RAPD反应的影响, 即在25μL总反应体系中, Mg^2+的适宜浓度为1.5～2.5mmol·L^-1、dNTPs的适宜浓度为0.2～0.3mmol·L^-1、随机引物的浓度以1.2μmol·L^-1为宜、Taq酶的用量以2.0U为佳、模板DNA的最适用量为50ng。本研究的PCR扩增程序为94℃预变性8min, 94℃变性1min, 37℃退火1min, 72℃延伸2min, 设40个循环, 最后72℃保温6min。