抗冻基因CBF_2表达载体构建及转化紫花苜蓿的研究

编号 zgly0000711304

文献类型 期刊论文

文献题名 抗冻基因CBF_2表达载体构建及转化紫花苜蓿的研究

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 刘晓静  郝凤  张德罡  毛娟  于铁峰 

作者单位 甘肃农业大学草业学院  草业生态系统教育部审点实验室中-美草地畜牧业可持续发展研究中心 

母体文献 草业学报 

年卷期 2011,20(2)

页码 193-200

年份 2011 

分类号 S551.703.4 Q945.7 

关键词 抗冻基因CBF2  载体构建  农杆菌  紫花苜蓿  转化 

文摘内容 本研究以拟南芥基因组DNA为模板,用PCR方法扩增目的基因,连接到PGEM-T Easy Vector载体上构建成克隆载体T-CBF2。用BamHⅠ和SacⅠ分别对克隆载体T-CBF2和植物表达载体PBI121进行双酶切,获得目的片段和线性质粒。在T4DNA连接酶的作用下进行定向连接,构建成植物表达载体P-T-CBF2。采用直接转化法将重组子导入根癌农杆菌EHA105。经PCR鉴定,重组质粒已成功导入根癌农杆菌中。通过农杆菌介导法转化和田苜蓿,现在已经得到转基因的苜蓿愈伤组织。