新疆大叶紫花苜蓿BADH基因转化体系的研究

编号 zgly0001469258

文献类型 期刊论文

文献题名 新疆大叶紫花苜蓿BADH基因转化体系的研究

作者 张丽  甘晓燕  石磊  陈虞超  聂峰杰  宋玉霞 

作者单位 宁夏农林科学院农业生物技术研究中心 

母体文献 草地学报 

年卷期 2014年02期

年份 2014 

分类号 S541.1 

关键词 紫花苜蓿  转化  农杆菌  BADH基因  转基因植株 

文摘内容 以新疆大叶苜蓿（Medicago sativa‘Xinjiang Daye’）叶片作为转化受体,利用农杆菌介导法将从梭梭（Haloxylon ammodendron）中获得的甜菜碱醛脱氢酶基因（BADH）转化紫花苜蓿,研究选择剂卡那霉素对愈伤组织分化的影响,并采用正交试验设计优化了影响紫花苜蓿转化的4个主要因子,建立了农杆菌介导的紫花苜蓿高效转化体系,获得了转基因植株。结果表明:卡那霉素在愈伤组织分化培养时的上限浓度以50 mg·L-1为宜;转化过程中当浸染时间为5 min,菌液浓度OD600为0.2,外植体预培养6 d,共培养后清洗外植体的头孢雷素（Cef）浓度为800 mg·L-1是最佳转化方案,抗性芽分化率达到65.5%;4个因子中菌液浓度对转化率影响最大,清洗外植体的Cef浓度和浸染时间影响次之,外植体预培养时间的影响最小。经PCR和RT-PCR检测,初步证明了BADH基因已经整合到紫花苜蓿中,转化率为16.0%。