苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白基因cry1Ab16的克隆及表达

编号 zgly0000312350

文献类型 期刊论文

文献题名 苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白基因cry1Ab16的克隆及表达

作者 汤慕瑾  谭乐  余健秀  袁美妗  庞义 

作者单位 中山大学昆虫研究所生物防治国家重点实验室 

母体文献 微生物学报 

年卷期 2003,43(4)

页码 417-423

年份 2003 

分类号 Q933  S482.3 

关键词 苏云金芽胞杆菌  杀虫晶体蛋白基因  cry1Ab16  克隆  表达  微生物杀虫剂 

文摘内容 通过对已知cry1类基因以及已发表的cry1 Ab的序列进行分析, 分别设计了引物P1、P2、P3和P4, 首次从无晶体的芽胞杆菌AC—11中扩增到一个苏云金芽胞杆菌杀虫晶体蛋白(Insecticidal crystal protein, ICP)cry1 Ab类基因。测序结果显示该基因与已知的cry1 Ab1基因有8个核苷酸不同, 编码的蛋白有7个氨基酸差异。此基因已登录GenBank, 并命名为新亚型基因cry1Ab16(Ac.NO.AF375608)。Southern杂交结果进一步证实该基因存在于菌体的质粒上。将cry1 Ab16基因克隆到Bck成hiacoli表达载体pQE30上并转化E.coli M15。Western印迹分析表明, E.coli M15表达了130kD的Cry1 Ab16蛋白, 但此蛋白不稳定, 大部分降解成65kD的蛋白。将表达Cry1 Ab16蛋白的大肠杆菌用涂布法对三龄小菜蛾(Plutella xylostella)毒力测定, 其LC50为258.3mg/L; 对其他夜蛾科害虫的生长发育也有明显的抑制作用。