利用原核表达的外壳蛋白制备草莓轻型黄边病毒抗血清

编号 zgly0001444118

文献类型 期刊论文

文献题名 利用原核表达的外壳蛋白制备草莓轻型黄边病毒抗血清

作者 代红艳  于翠梅  张志宏  李贺  马跃  刘月学 

作者单位 沈阳农业大学园艺学院 

母体文献 果树学报 

年卷期 2013年04期

年份 2013 

分类号 S436.68 

关键词 草莓轻型黄边病毒(SMYEV)  CP  原核表达  抗血清  ELISA 

文摘内容 【目的】探索以原核表达的草莓轻型黄边病毒(SMYEV)外壳蛋白(CP)为抗原制备抗血清的方法,从而建立利用ELISA检测SMYEV的技术体系。【方法】利用IPTG诱导SMYEV CP重组蛋白在大肠杆菌中表达,分离纯化重组蛋白并以其为抗原对新西兰兔进行免疫。血清效价达到要求后,分离纯化抗血清并利用DAC-ELISA对草莓植株进行SMYEV检测,同时利用RT-PCR对DAC-ELISA检测结果进行验证。【结果】宿有SMYEV CP基因的大肠杆菌经IPTG诱导后出现一条52.0 ku左右的特异性重组蛋白谱带,以纯化的重组蛋白为抗原制备出专一性较强的针对SMYEV的抗血清,该抗血清稀释800倍后仍能有效检测草莓植株中的SMYEV。利用DAC-ELISA和RT-PCR对26份草莓试材分别进行SMYEV检测,2种检测方法的检测结果基本一致。【结论】以原核表达的SMYEV CP为抗原可以制备出专一性较强、效价较高的SMYEV的抗血清。