苹果属植物树皮组织总蛋白提取及分离方法的建立

编号 zgly0001496961

文献类型 期刊论文

文献题名 苹果属植物树皮组织总蛋白提取及分离方法的建立

作者 张彩霞  田义  张利义  肖龙  丛佩华 

作者单位 中国农业科学院果树研究所农业部园艺作物种质资源利用重点实验室  中国农业科学院果树研究所 

母体文献 植物学报 

年卷期 2015年06期

年份 2015 

分类号 S661.1 

关键词 苹果  树皮  总蛋白  提取  双向电泳 

文摘内容 为了建立适于苹果属植物树皮组织总蛋白提取的技术方法,以8年生华月苹果(Malus domestica)树枝条为试材,通过比较不同提取方法(TCA-丙酮沉淀法(A)、甲醇/醋酸铵沉淀法(B)和改良的Tris-酚抽提方法(C))并优化提取条件,确立了最适提取及分离方法为改良的Tris-酚抽提方法。在2-DE分离时,该方法所获得的样品图谱中蛋白点总数为993个,明显多于TCA-丙酮沉淀(418个)和甲醇醋酸铵沉淀(674个)方法,并且与其它两种方法相比,该方法获得的图谱背景更清晰,蛋白点聚焦效果更好。此外,经过3个梯度上样量的图谱分离效果比较,确定了800μg为本研究中2-DE分析的理想上样量。另外,为了验证该提取及分离方法的可行性,进一步对蛋白质表达谱中的部分蛋白点进行了质谱分析,且这些蛋白点均得到了成功鉴定。该研究通过优化总蛋白提取方法及样品上样量等条件,获得了理想的双向电泳分离图谱,为苹果属植物树皮组织材料的蛋白质组学研究奠定了基础。