黑腹果蝇GABA受体GRD亚基和LCCH3亚基的克隆、表达与鉴定

编号 zgly0001421867

文献类型 期刊论文

文献题名 黑腹果蝇GABA受体GRD亚基和LCCH3亚基的克隆、表达与鉴定

作者 张晓敏  马彩霞  任天瑞  王丰 

作者单位 上海师范大学生命与环境科学学院资源化学教育部重点实验室 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2012年03期

年份 2012 

分类号 Q78 

关键词 黑腹果蝇  GABA受体  GRD亚基  LCCH3亚基  基因克隆  表达  鉴定 

文摘内容 昆虫GABA受体(γ-aminobutyric acid receptor,GABAR)是杀虫剂的重要靶标之一。本研究以黑腹果蝇Drosophila melanogaster整体组织的cDNA作为模板,采用RT-PCR技术扩增了黑腹果蝇GABA受体LCCH3亚基和GRD亚基的cDNA序列,并克隆至pET-32a表达载体上,测序结果表明获得的序列与基因库中已发表的序列一致性在99%以上,无移码突变。在IPTG的诱导下,LCCH3基因成功在大肠杆菌Escherichia coli中表达,而GRD基因未表达。通过包涵体洗涤、变性、Ni2+亲合层析纯化、稀释复性获得纯化的重组表达的LCCH3蛋白,并用圆二色谱测定了目标蛋白的二级结构,主要富含β结构。该研究结果为研究昆虫GABAR的结构和功能关系提供了重要的参考数据。