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马铃薯StSOD1基因酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定



编号 zgly0001693868

文献类型 期刊论文

文献题名 马铃薯StSOD1基因酵母双杂交诱饵载体的构建及鉴定

作者 车育章  张宁  朱熙  王树林  陈馨  罗红玉  洪旭升  司怀军 

作者单位 甘肃农业大学生命科学技术学院  甘肃农业大学甘肃省干旱生境作物学重点实验室 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2020年01期

年份 2020 

分类号 S532 

关键词 马铃薯(SolanumtuberosumL.)  SOD1基因  酵母双杂交  诱饵载体 

文摘内容 为了筛选与马铃薯超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)基因StSOD1作用的上游蛋白,构建其酵母双杂交诱饵重组载体。本研究利用PCR方法扩增得到马铃薯StSOD1的基因片段,通过与pMD-T18连接构建克隆载体,经验证构建成功后,与诱饵载体pGBKT7连接构建诱饵重组载体,经双酶切以及测序检测验证重组载体构建成功后,通过PEG/Li Ac法将诱饵载体pGBKT7-StSOD1与空载体pGBKT7分别转化到酵母AH109感受态细胞中,检测其是否有自激活作用和对酵母菌株的毒性作用。结果表明:经PCR扩增后得到了StSOD1基因,成功构建了诱饵重组载体pGBKT7-St SOD1,并且此诱饵载体无自激活活性和对酵母菌株的毒性作用。此研究结果可进一步为筛选与StSOD1互作的蛋白质及功能研究提供科学依据。

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