杧果矮化基因GA2ox的克隆、亚细胞定位及表达分析

编号 zgly0001695109

文献类型 期刊论文

文献题名 杧果矮化基因GA2ox的克隆、亚细胞定位及表达分析

作者 张继  黄国弟  张宇  欧克纬  龙凌云  庞新华  卢业飞 

作者单位 广西农业科学院广西亚热带作物研究所 

母体文献 经济林研究 

年卷期 2020年01期

年份 2020 

分类号 S667.7 

关键词 矮化  杧果  克隆  亚细胞定位  表达分析 

文摘内容 【目的】为研究杧果树体发育过程中GA合成调控以及GA信号转导的作用提供参考,并为矮生型杧果品种及矮化砧木的选育提供参考。【方法】以广西地方具有矮化特性杧果品种‘桂热杧82号’无病虫侵害的嫩叶为材料,对其GA2ox基因克隆,并进行亚细胞定位及表达分析。通过改良Trizol法提取叶片总RNA,利用简并引物克隆GA2ox基因片段,采用RACE法得到基因的全长cDNA序列,命名为MiGA2ox。通过生物信息学方法分析其结构特征,利用GFP进行亚细胞定位,采用实时荧光定量RT-PCR技术研究MiGA2ox基因在‘桂热杧82号’与乔化品种‘金煌杧’中的表达特性。【结果】MiGA2ox全长cDNA序列为2 051 bp,含有3′非翻译区约900 bp,5′非翻译区约400 bp。GA2ox序列均含有完整的开放阅读框,终止密码子为TGA,编码341个氨基酸,与橙子（XM006467404.3）、柑橘（XM006449629.2）、木薯（XM021738345.1）、巴西橡胶树（XM021820571.1）、陆地棉（XM016896568.1）、中棉（XM012597405.1）的一致性分别为79%、79%、78%、78%、76%、75%。MiGA2ox编码蛋白的相对分子质量为38 729.4 Da,等电点为6.56,为稳定蛋白,无信号肽,无明显疏水区,无跨膜结构域。根据共聚焦激光扫描显微镜观察结果可知,MiGA2ox编码蛋白定位于细胞核中。在随机选择2个时间节点,矮化品种‘桂热杧82号’MiGA2ox的表达量均高于乔化品种‘金煌杧’。【结论】‘桂热杧82号’MiGA2ox基因的表达与其矮化性状有关。