乌鳢免疫球蛋白M重链和免疫球蛋白轻链的克隆与特征分析

编号 zgly0000702072

文献类型 期刊论文

文献题名 乌鳢免疫球蛋白M重链和免疫球蛋白轻链的克隆与特征分析

作者 贾伟章  周秀霞 

作者单位 广东药学院生命科学院  中国科学院水生生物研究所 

母体文献 华中农业大学学报 

年卷期 2010(1)

页码 79-84

年份 2010 

分类号 S917.4 Q959.481 

关键词 免疫球蛋白M  重链  轻链  克隆  乌鳢 

文摘内容 应用RACE-PCR方法克隆并鉴定了乌鳢免疫球蛋白M(immunoglobulin M, IgM)重链(H)和免疫球蛋白轻链(L)全长cDNA。乌鳢IgHcDNA全长1912个核苷酸(nt), 包含1797nt的开放阅读框, 编码598个氨基酸(aa)。IgH恒定区(CH)均包含1对保守的半胱氨酸残基形成链内二硫键, 其中CH1区氨基末端存在保守的半胱氨酸残基与轻链形成链间二硫键, 4个推测的N-糖基化位点(NXT和NXS)则分别位于CH1、CH2和CH4。序列比对发现乌鳢IgHCH1与CH2交界处氨基酸序列的插入使铰链区肽段较其他硬骨鱼IgH长, 此外IgHCH4区羧基末端参与单体间聚合的半胱氨酸被赖氨酸替换, 这反映乌鳢IgH分子结构的特异性。序列相似性比较显示乌鳢IgH与点带石斑鱼、黑鳍冰鱼、牙鲆、虹鳟的相似性依次为55%、50%、45%和36%, 与斑马鱼类的相似性较低(为28%)。乌鳢kLcDNA全长941nt, 包含729nt的开放阅读框, 编码242个aa。轻链可变区(VL)和恒定区(CL)均包含保守的半胱氨酸, 形成链内和链间二硫键。序列比对分析表明乌鳢IgL与五条鲫和花狼kL的相似性为78%和77%, 而与斑点叉尾鲴和虹鳟的相似性仅为32%和31%。根据kH和IgL恒定区氨基酸序列构建系统进化树, 鱼类IgH形成硬骨鱼和软骨鱼两大分支, 其中乌鳢kH与河豚IgH的亲缘关系较近; 硬骨鱼kL系统树显示3个主要的分支: u、L2和L3, 乌鳢kL位于u分支的uA亚类。