密码子优化型鹅细小病毒病毒样颗粒的表达与鉴定

编号 zgly0001423464

文献类型 期刊论文

文献题名 密码子优化型鹅细小病毒病毒样颗粒的表达与鉴定

作者 陈宗艳  李传峰  高景鹏  朱英奇  王玢瑸  杨宗伟  刘光清 

作者单位 中国农业科学院上海兽医研究所 

母体文献 中国动物传染病学报 

年卷期 2012年04期

年份 2012 

分类号 S852.65 

关键词 鹅细小病毒  VP2  密码子优化  杆状病毒表达系统  病毒样颗粒 

文摘内容 根据昆虫细胞密码子的偏嗜性,对鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)VP2基因的密码子进行优化,利用Bac-to-Bac表达系统构建了表达优化VP2基因的重组杆状病毒,通过感染昆虫细胞(Sf9)获得病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)。SDS-PAGE分析显示Sf9细胞中出现了65 kDa的蛋白条带,间接免疫荧光(indirect immunofluorescent assay,IFA)和Western blot结果均证实表达产物能与鼠抗GPV VP2抗体发生特异性反应,说明其具有良好的免疫反应性。同时,试验结果还证明,密码子优化后的GPV VP2基因在昆虫细胞中表达量得到了提高,明显高于野生型VP2基因。透射电镜观察纯化后的昆虫细胞表达产物,可见直径约30 nm的VLPs,表明密码子的优化并不影响VP2蛋白的组装。本研究为进一步研制诊断抗原以及新型GPV疫苗等奠定了基础。