犬细小病毒NY株VP2蛋白的原核表达及反应原性鉴定

编号 zgly0001495191

文献类型 期刊论文

文献题名 犬细小病毒NY株VP2蛋白的原核表达及反应原性鉴定

作者 毛倩倩  卜宾  唐青海  阚云超  姚伦广  唐存多  焦铸锦  杨建伟 

作者单位 南阳师范学院南阳市兽医生物工程技术研究中心河南省伏牛山昆虫生物学重点实验室/昆虫生物反应器河南省工程实验室 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2015年06期

年份 2015 

分类号 S852.655 

关键词 犬细小病毒NY株  VP2  原核表达  鉴定 

文摘内容 犬细小病毒(CPV)编码的VP2基因容易发生变异,导致病毒嗜性和致病性的改变。为制备一株高致病性的CPV毒株(NY株,基因型为2a型)重组VP2蛋白,构建重组原核表达载体pET28a-CPVVP2,转化E.coli BL21(DE3)表达菌株,通过不同温度、不同IPTG浓度和不同诱导时间等条件的优化进行表达蛋白,采用SDS-PAGE和Western blot进行蛋白鉴定。结果表明,重组CPV-NY毒株VP2蛋白(rVP2)的分子质量约为72ku,在不同温度条件下均以包涵体形式存在,在37℃条件下以终浓度为0.2mmoL/L IPTG诱导4h表达量达到最高。rVP2不仅与His标签mAb反应,也能与CPV特异性阳性血清反应,说明rVP2具有良好的反应原性,为CPV抗体检测试剂盒和基因工程疫苗的研究奠定了基础。