绵羊Myostatin基因shRNA干扰载体及双元干扰载体的构建与鉴定

编号 zgly0001469799

文献类型 期刊论文

文献题名 绵羊Myostatin基因shRNA干扰载体及双元干扰载体的构建与鉴定

作者 王红娜  孙洪新  张英杰  刘月琴 

作者单位 河北农业大学动物科技学院 

母体文献 中国草食动物科学 

年卷期 2014年S1期

年份 2014 

分类号 Q78 

关键词 绵羊  MSTN  RNA干扰  双元载体 

文摘内容 为利用RNAi技术研究绵羊肌肉抑制素基因(myostatin,MSTN)的作用,设计针对MSTN编码序列的shRNA干扰片段,合成shRNA干扰序列M1、M2,各自制备成双链寡核苷酸,退火后形成的寡核苷酸双链克隆到Pgenesil载体。连接产物转化到感受态细胞,增菌,质粒扩增,质粒DNA抽提,使用PstⅠ、kpnⅠ进行双酶切和DNA测序鉴定重组克隆。为了比较双元干扰载体与单元干扰载体的干扰效率,将干扰序列M1、M2连接到同一载体,进行一个载体编码两条shRNA的双元干扰片段载体的构建。经酶切及测序鉴定两种载体均构建成功。