Bmo-miR-2755*对丝素蛋白基因BmFib-L和BmP25表达的调控作用

编号 zgly0001495807

文献类型 期刊论文

文献题名 Bmo-miR-2755*对丝素蛋白基因BmFib-L和BmP25表达的调控作用

作者 范洋洋  陈晨  王欣  宋菲  唐顺明  易咏竹  沈兴家 

作者单位 江苏科技大学生物技术学院  江苏省蚕桑生物学与生物技术重点实验室  中国农业科学院蚕业研究所  农业部蚕桑遗传改良重点实验室 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2015年05期

年份 2015 

分类号 Q78  S881.2 

关键词 miRNA  家蚕  Bmo-miR-2755*  丝素轻链基因  P25基因  表达调控 

文摘内容 为了研究家蚕miRNA对丝素蛋白基因表达的调控作用,采用生物信息学方法筛选获得对家蚕丝素轻链基因(BmFib-L)和P25蛋白基因(BmP25)有潜在调控作用的Bmo-miR-2755*。利用半定量RT-PCR技术分析Bmo-miR-2755*及其靶基因BmFib-L、BmP25在家蚕4~5龄期幼虫后部丝腺和5龄3 d幼虫不同组织器官中的表达水平,结果显示三者在后部丝腺组织中的表达水平都较高,呈现严格的时空特异性。以pcDNA3质粒为载体,构建Bmo-miR-2755*的重组表达载体pcDNA3[ie1-egfpprimiR-2755*-SV40];以pGL3.0-Basic质粒为载体,分别构建BmFib-L 3’UTR、BmP25 3’UTR与荧光素酶报告基因luc融合的重组报告质粒pGL3.0[A3-luc-Fib-L-3’UTR-SV40]和pGL3.0[A3-luc-P25-3’UTR-SV40]。以海肾荧光素酶表达载体pRL-CMV为内参,分别将构建的Bmo-miR-2755*重组表达载体和2个重组报告质粒共转染BmN细胞,通过检测细胞中的荧光素酶活性,明确Bmo-miR-2755*可显著下调BmFib-L基因的表达,并能上调BmP25基因的表达,但上调作用未达显著水平。上述结果为研究家蚕miRNA的功能和阐明蚕丝蛋白基因表达调控分子机制提供了新的实验数据。