桑天牛线粒体细胞色素氧化酶Ⅰ基因的PCR反应体系优化

编号 zgly0000687668

文献类型 期刊论文

文献题名 桑天牛线粒体细胞色素氧化酶Ⅰ基因的PCR反应体系优化

学科分类 220.3020;森林昆虫学

作者 马向超  黄大庄  张爽  任志彬 

作者单位 河北农业大学林学院 

母体文献 河北林果研究 

年卷期 2010,25(4)

页码 384-388

年份 2010 

分类号 S763.38 

关键词 桑天牛  细胞色素氧化酶Ⅰ基因  PCR反应体系  正交组合  单因素 

文摘内容 建立一整套适用于研究桑天牛线粒体细胞色素氧化酶I(mtDNA CO I)基因的PCR反应体系,研究不同地理分布的桑天牛遗传多样性。通过L16(4^5)正交组合试验和单因素梯度试验对缓冲液(Mg^2+)、dNTP、随机引物、TaqDNA聚合酶、模板DNA的浓度和退火温度、循环次数等影响PCR扩增的重要因素进行优化。试验结果表明,50μL反应体系及反应程序中各因素优化组合为: 缓冲液(含Mg^2+)0.9mmol/L,dNTP 0.15mmol/L,随机引物0.44μnol/L,TaqDNA聚合酶3.0U,模板DNA75ng;退火温度47℃,循环次数35次。