编号
zgly0001412590
文献类型
期刊论文
文献题名
白僵菌RAPD-PCR反应体系优化
作者单位
河北农业大学
母体文献
东北林业大学学报
年卷期
2012年01期
年份
2012
分类号
S476.1
关键词
白僵菌
RAPD-PCR
正交组合
文摘内容
为了建立一套适宜于白僵菌(Beauveria bassiana)退化研究的RAPD-PCR反应体系及反应程序,通过采用L16(45)正交试验及退火温度和循环次数的单因素优化对反应体系中的各因素进行优化组合。结果表明:20μL PCR反应体系及反应程序中各因素优化组合为,10×Buffer 2μL,MgCl2(25 mmol/L)2.4μL,4种dNTP(各2.5mmol/L)0.8μL,随机引物(10μmol/L)1.4μL,TaqDNA聚合酶(5 U/μL)0.4μL,模板DNA(10 mg/L)1μL。反应条件为,94℃预变性2 min,94℃变性30 s,38℃退火40 s,72℃延伸1 min,循环次数40次,72℃延伸5 min。