非洲马瘟病毒RT-LAMP检测方法的建立

编号 zgly0001562117

文献类型 期刊论文

文献题名 非洲马瘟病毒RT-LAMP检测方法的建立

作者 姜睿姣  邬旭龙  张鹏飞  王印  杨泽晓  姚学萍 

作者单位 四川农业大学动物医学院  动物疫病与人类健康四川省重点实验室 

母体文献 动物医学进展 

年卷期 2017年12期

年份 2017 

分类号 S852.652 

关键词 非洲马瘟病毒  环介导等温扩增  检测 

文摘内容 为了建立非洲马瘟病毒(AHSV)环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)快速检测方法,基于AHSV VP7基因保守序列,设计2对特异性扩增引物。通过对反应体系中各组分浓度,反应温度及时间的优化,建立了快速、灵敏的AHSV RT-LAMP检测方法,并对该方法特异性、灵敏度、重复性进行探索。结果表明,在63℃恒温下反应45min,便可进行高效率的特异性扩增。反应产物经琼脂糖凝胶电泳和染料可视化鉴定,能够快速有效检测AHSV。用建立的方法检测马属动物易感的4种疫病病原,结果均为阴性,证实具有较高的特异性。灵敏度是RT-PCR的1 000倍。建立了AHSV RT-LAMP检测方法,具有快速、特异、灵敏、操作简单、设备要求低的特点,适合用于现场AHSV快速检测。