改进简并PCR法克隆盐生杜氏藻烯醇酶基因

编号 zgly0001274252

文献类型 期刊论文

文献题名 改进简并PCR法克隆盐生杜氏藻烯醇酶基因

作者 白林含  乔代蓉  郑鸣  徐辉  李茜  蒋彦  杨志荣  曹毅 

作者单位 四川大学生命科学学院  四川大学生命科学学院 

母体文献 北京林业大学学报 

年卷期 2004年04期

年份 2004 

分类号 Q78 

关键词 盐藻  烯醇酶  基因克隆  简并PCR  RACE 

文摘内容 该文针对基因同源性克隆中存在的问题 ,采用改进简并PCR法对盐生杜氏藻具抗逆功能的烯醇酶基因 .改进后的同源引物简并度从 10 0 0倍以上降低至 10 0倍以下 ,利用RT PCR成功地扩增出一条 6 30bp的盐藻cDNA片段 ,该片段与其他物种的烯醇酶基因具有很高的相似性 .在此基础上进行 5’和 3’RACE获得了盐藻烯醇酶基因的全长cDNA ,其长度为 1734bp .序列分析表明 ,该基因与莱茵衣藻烯醇酶基因的相同性达 83% ,相似性达 89% ,且在进化上与莱茵衣藻的亲缘关系最近 .Southern杂交结果显示 ,该基因在盐藻中可能为单一拷贝