西瓜渗调蛋白ClOsm基因克隆及其编码蛋白的抑菌活性

编号 zgly0001733332

文献类型 期刊论文

文献题名 西瓜渗调蛋白ClOsm基因克隆及其编码蛋白的抑菌活性

作者 黄小忠  韦湘  徐晓燕 

作者单位 江苏农林职业技术学院茶与食品科技学院 

母体文献 西北农林科技大学学报(自然科学版 

年卷期 2021,(11)

页码 1-8

年份 2021 

分类号 S651 

关键词 西瓜  渗调蛋白  基因表达  抗病育种  抑菌活性 

文摘内容 [目的]克隆西瓜(Citrullus lanatus(Thunb.) Matsum.et Nakai)渗调蛋白基因ClOsm,明确该基因编码蛋白的抑菌活性,为进一步研究ClOsm基因功能并开展西瓜抗病分子育种奠定基础。[方法]采用同源克隆法,克隆西瓜ClOsm基因,分析其序列特征,并构建系统进化树。利用实时荧光定量PCR(RT-PCR)技术分析ClOsm基因的表达特征。利用原核表达系统表达并纯化His-ClOsm重组蛋白,检测其对枯萎病菌、蔓枯病菌、白粉病菌、茄病镰刀菌和轮枝镰刀菌的体外抑菌活性。[结果]从枯萎病菌侵染的西瓜根系组织中克隆到渗调蛋白基因ClOsm(GenBank登录号为MF445019),其长度为768 bp,编码255个氨基酸,预测蛋白质分子质量为27.52 ku,等电点为7.78。氨基酸结构分析显示,ClOsm含有TLP蛋白的保守结构域。系统进化分析表明,ClOsm与冬瓜BhOsm蛋白的亲缘关系最近,相似度达95%,且归为osmotin类型的类甜蛋白。实时荧光定量分析显示,ClOsm基因在西瓜根、茎、叶组织中均有表达,根中表达量最高;枯萎病菌侵染能够显著诱导ClOsm基因的表达,在侵染120 h时表达量最高。融合蛋白His-ClOsm体外抑菌活性检测结果表明,ClOsm蛋白可以显著抑制枯萎病菌、蔓枯病菌、白粉病菌、茄病镰刀菌和轮枝镰刀菌等病原菌的生长,抑制率分别为70.2%,60.8%,65.3%,55.4%和46.6%。[结论]克隆了西瓜ClOsm基因,并纯化得到ClOsm重组蛋白,该蛋白能够显著抑制病原真菌的生长。