扶桑绵粉蚧钙调蛋白基因的原核表达与表达谱分析

编号 zgly0000823655

文献类型 期刊论文

文献题名 扶桑绵粉蚧钙调蛋白基因的原核表达与表达谱分析

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 罗梅  宾淑英  林进添 

作者单位 仲恺农业工程学院 

母体文献 西北农林科技大学学报: 自然科学版 

年卷期 2013(12)

页码 138-142

年份 2013 

分类号 Q969.369.4 

关键词 扶桑绵粉蚧  钙调蛋白  基因表达谱  原核表达 

文摘内容 【目的】:探究我国重要入侵生物扶桑绵粉蚧(Phenacoccus solenopsis Tinsley)钙调蛋白基因(PsCam)在各虫态中的表达差异及PsCam蛋白在体外的异源表达, 为进一步揭示PsCam的生理功能提供参考。【方法】:克隆PsCam基因的ORF, 推导其编码的氨基酸序列, 采用生物信息学方法, 分析扶桑绵粉蚧钙调蛋白的结构。构建PsCam原核表达载体, 将其转化到大肠杆菌中进行诱导表达, 并对产物进行纯化。采用实时荧光PCR方法, 分析该基因在扶桑绵粉蚧各个虫态中的相对表达量。【结果】:扶桑绵粉蚧钙调蛋白基因的氨基酸序列分析结果显示, 该蛋白没有信号肽, 具有2个EF-hand钙结合结构域, 有13个Ca2+结合位点。成功构建了原核表达载体pET28a-PsCam, 经诱导表达后获得了重组的Cam蛋白, 目的蛋白的分子质量约为17 ku。PsCam mRNA在不同虫态的扶桑绵粉蚧中都有表达, 在成熟雌虫中的表达量最低, 在1龄幼虫中的表达量最高, 是成熟雌虫的7.1倍。【结论】:在原核表达系统中诱导表达了重组PsCam蛋白; PsCam基因在扶桑绵粉蚧不同虫态中差异表达。