美洲大蠊变应原CrPI的表达、纯化与免疫学特性鉴定

编号 zgly0001298792

文献类型 期刊论文

文献题名 美洲大蠊变应原CrPI的表达、纯化与免疫学特性鉴定

作者 高波  刘志刚  邢苗  徐宏  罗时文  赖仞 

作者单位 深圳大学生命科学学院  深圳市微生物基因工程重点实验室  深圳市微生物基因工程重点实验室 深圳518060  深圳518060深圳市微生物基因工程重点实验室  深圳518060  深圳518060 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2005年01期

年份 2005 

分类号 R392 

关键词 美洲大蠊  重组变应原CrPI  蛋白表达  亲和层析  免疫印迹 

文摘内容 以阳性噬菌体克隆为模板 ,通过PCR扩增出目的基因片段并克隆入T载体 ,经测序证实为美洲大蠊Periplanetaamericana变应原CrPI后 ,将该基因亚克隆入表达载体pGEX 5X 1。美洲大蠊变应原CrPI在大肠杆菌中得到高效表达 ,但主要以包涵体形式存在于沉淀中。目的蛋白溶于 6mol L盐酸胍并经稀释复性后 ,经GlutathioneSepharoseTM 4B亲和层析 ,纯度达 90 %以上。以蟑螂过敏病人血清进行免疫印迹检测 ,结果显示重组变应原具有良好的IgE结合活性。