枯草芽孢杆菌NCD-2菌株的高效电击转化

编号 zgly0001399455

文献类型 期刊论文

文献题名 枯草芽孢杆菌NCD-2菌株的高效电击转化

作者 王培培  郭庆港  李社增  鹿秀云  李宝庆  张莉萍  马平  董金皋 

作者单位 河北农业大学植物保护学院  河北省农林科学院植物保护研究所/河北省农业有害生物综合防治工程技术研究中心  河北省张家口市植物保护植物检疫站 

母体文献 中国生物防治学报 

年卷期 2011年03期

年份 2011 

分类号 S476.8 

关键词 枯草芽孢杆菌  电击转化  转化效率 

文摘内容 本研究对影响枯草芽孢杆菌Bacillus subtilisNCD-2菌株遗传转化的因素进行摸索并对其转化条件进行优化,建立了该菌株的高效电击转化体系。通过比较5个不同大小和携带不同来源复制子的质粒对其转化效率的影响,发现质粒大小与NCD-2菌株的电击转化效率之间没有相关性;而携带来源于Bacillus coagu-lans复制子的质粒pNW33N时,NCD-2菌株的电击转化效率最高,达到3.53×104cfu.μg-1DNA,说明复制子来源是影响转化效率的一个重要因素。采用pNW33N质粒在不同电阻、电场强度及培养时间下的电击转化效率的研究结果表明,该菌株转接到生长培养基后,37℃、150r.min-1培养3.5h,在电阻值200Ω、电场强度14.0kV.cm-1的条件下转化效率最高,达到6.07×104cfu.μg-1DNA。优化后的转化体系为顺利开展枯草芽孢杆菌NCD-2菌株的分子操作奠定了基础。