马尾松亲环素基因全长cDNA的克隆与原核表达

编号 zgly0000656613

文献类型 期刊论文

文献题名 马尾松亲环素基因全长cDNA的克隆与原核表达

学科分类 220.1520;林木遗传学

作者 王猛  曹福祥  龙绛雪 

作者单位 中南林业科技大学林学院 

母体文献 湖南师范大学自然科学学报 

年卷期 2010,33(2)

页码 92-97

年份 2010 

分类号 Q785 

关键词 马尾松  亲环素  序列分析  原核表达 

文摘内容 亲环素(Cyclophilins,CyPs)具有肽酰脯氨酸顺反异构酶活性,催化蛋白质折叠过程,并且起着分子伴侣的作用,同时参与mRNA加工和信号转导等生物学过程.本研究采用RT-PCR技术和RACE-PCR技术,从马尾松(Pinus massoniana)中分离了亲环素基因cDNA全长,命名为cyp-pm1(GenBank登录号: GQ497815).该基因全长1 002 bp,编码区全长为519 bp,编码172个氨基酸,在5′端有106 bp非编码区,在3′端含有377 bp(其中含有26 bp的polyA)非编码区.生物信息学分析表明该基因编码的蛋白质等电点和相对分子质量为8.82和18 212,含有典型的亲环素肽酰脯氨酸顺反异构酶蛋白功能域.序列分析表明该基因与植物亲环素家族基因有较高的同源性.通过亚克隆技术把cyp-pm1的开放读码框克隆到表达载体pET-24a(+)中,成功构建了pET-cyp-pm1重组表达载体,并在IPTG诱导下在大肠杆菌中成功表达了与推导相一致的蛋白,相对分子质量约1.8×104.