粘虫中肠α-淀粉酶活性测定方法的参数优化

编号 zgly0000521971

文献类型 期刊论文

文献题名 粘虫中肠α-淀粉酶活性测定方法的参数优化

学科分类 220.3020;森林昆虫学

作者 孔玉萍  黄青春  刘曼慧  丰俊  刘扬 

作者单位 华东理工大学药学院 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2007,50(10)

页码 981-988

年份 2007 

分类号 Q966 

关键词 粘虫  α-淀粉酶  参数优化  动力学常数 

文摘内容 针对粘虫Mythimna separata中肠α-淀粉酶筛选了11种不同参数组合的3,5-二硝基水杨酸活性测定方法,并对其中最适组合的各个参数进行了优化。结果表明：在离体测定条件下,粘虫中肠α-淀粉酶活性的最优化测定参数为0.03mol/L磷酸盐缓冲液(pH8.0,含有55mmol/L NaCl)、温度45℃、吸收波长480nm。Ca^2＋对α-淀粉酶活性具有抑制作用。该优化法能够显著降低粘虫、德国小蠊Blattella germanica、黄粉虫Tenebrio molitor、淡色库蚊Culexpipiens pallens和家蝇Musca domestica等昆虫α-淀粉酶的米氏常数Km值,且粘虫和德国小蠊α-淀粉酶的Vmax值增大,但黄粉虫、淡色库蚊和家蝇α-淀粉酶的Vmax值均明显减小。结果说明,在该优化体系下,粘虫α-淀粉酶与底物的亲和力增强,最大反应速度增大,测定酶活性的准确性和灵敏度显著提高;同时该优化体系也可作为测定德国小蠊α-淀粉酶活性的优化方法,但不适合作为黄粉虫、淡色库蚊和家蝇α-淀粉酶的最优化测定方法。