利用柞蚕核型多角体病毒(ApNPV)表达载体系统在柞蚕蛹中表达人生长激素

编号 zgly0001468534

文献类型 期刊论文

文献题名 利用柞蚕核型多角体病毒(ApNPV)表达载体系统在柞蚕蛹中表达人生长激素

作者 叶博  王林美  赵振军  岳冬梅  张波  李树英  范琦 

作者单位 辽宁省农业科学院大连生物技术研究所  辽宁省野蚕重点实验室 

母体文献 蚕业科学 

年卷期 2014年02期

年份 2014 

分类号 S884.5 

关键词 柞蚕核型多角体病毒表达载体系统  柞蚕蛹  人生长激素  体外活性 

文摘内容 为探究柞蚕核型多角体病毒(ApNPV)表达载体-柞蚕蛹表达系统用于表达哺乳动物活性蛋白的可行性,利用该表达系统表达医用蛋白人生长激素(hGH)。构建插入hgh基因的转移表达载体pApM748BE/hgh,将该转移表达载体质粒DNA与病毒ApNPV-Δph/egfp+基因组DNA共转染樗蚕(Philosamia cynthiam)培养细胞Pc-01,用末端稀释法筛选获得重组病毒ApNPV-Δph/Δegfp/hgh+。采用Western blotting和ELISA方法,检测到柞蚕蛹感染重组病毒ApNPV-Δph/Δegfp/hgh+后第7天体液中就有hGH明显表达;感染后第13~14天蛹体液中的hGH含量保持较高水平,重组hGH的最高表达量可达251.18μg/mL;感染后第15~20天仍可以检测到hGH的表达,但表达产物出现降解现象。用活化的人红白血病细胞K562检测利用ApNPV表达载体系统在柞蚕蛹表达的重组hGH的体外活性,结果显示其对K562细胞的增殖具有明显的促进作用。