二斑叶螨多重抗性品系最优内参基因的筛选及CYP392A亚家族基因的表达分析

编号 zgly0001495709

文献类型 期刊论文

文献题名 二斑叶螨多重抗性品系最优内参基因的筛选及CYP392A亚家族基因的表达分析

作者 周兴隆  杨顺义  郝雨  王进军  张新虎  沈慧敏 

作者单位 甘肃农业大学草业学院草业生态系统省部共建教育部重点实验室中-美草地畜牧业可持续发展中心  西南大学植物保护学院昆虫学及害虫控制工程重点实验室 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2015年11期

年份 2015 

分类号 S433.7 

关键词 二斑叶螨  多重抗性  内参基因  CYP392A亚家族  基因表达量  RT-q PCR 

文摘内容 【目的】筛选出二斑叶螨Tetranychus urticae Koch抗甲氰菊酯、阿维菌素及螺螨酯混剂的实时定量PCR最优内参基因。【方法】选取5.8S rRNA,α-tubulin,TBP,β-actin,ELFn,RPL13a,GAPDH和SDHA 8个候选内参基因,以Ge Norm,Best Keeper和Normfinder 3个软件分析这8个基因在二斑叶螨多重抗性品系中的表达稳定性,并以筛选的内参基因分析二斑叶螨P450酶系CYP392A亚家族基因的表达水平。【结果】经Ge Norm,Best Keeper和Normfinder 3个软件综合评价确定ELFn基因为二斑叶螨敏感品系(susceptible strain,SS)和多重抗性品系(multipesticide resistant strain,Mp-R)各发育阶段的最优内参基因。以ELFn为内参基因对二斑叶螨CYP392A亚家族16个基因表达量进行分析,结果表明:经多重抗性选育40代后,Mp-R品系卵期CYP392A1表达量显著上调;CYP392A16基因在各发育阶段表达量极显著高于SS品系相应发育阶段;其他基因表达量在敏感品系和抗性品系之间差异不显著。【结论】筛选出了SS和Mp-R品系中各发育阶段最佳内参基因为EFLn;Mp-R品系CYP392A亚家族16个基因的表达量在幼螨和若螨阶段低于卵与成螨阶段,其中CYP392A16基因在二斑叶螨多重抗性的形成中起主要作用。该结果为二斑叶螨多重抗性研究奠定了一定基础。