扁桃拟茎点霉TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立与应用

编号 zgly0001545063

文献类型 期刊论文

文献题名 扁桃拟茎点霉TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立与应用

作者 王律  张华  赵玉强  褚姝频  吴翠萍  田艳丽  胡白石 

作者单位 南京农业大学植物保护学院  农作物生物灾害综合治理教育部重点实验室  无锡出入境检验检疫局  上海农业技术推广服务中心  江苏省植物保护站  江苏省出入境检验检疫局 

母体文献 植物病理学报 

年卷期 2017年01期

年份 2017 

分类号 S432.4 

关键词 扁桃拟茎点霉  histone H3  TaqMan探针  荧光定量PCR 

文摘内容 扁桃拟茎点霉（Phomopsis amygdali）引起的桃缢缩溃疡病是桃生产上重要的病害之一。带菌苗木及接穗是病害向无病区传播的主要途径。严格的检疫措施是保证无病区健康生产的关键。准确、灵敏、快速的检测方法是严格执行检疫措施及研究病害发生规律的有力工具。将扁桃拟茎点霉组蛋白H3（histone H3）基因与其近缘种比对发现,该基因特异性强,适合作为分子检测的靶标。针对histone H3基因为靶标,设计了特异性引物和Taq Man探针,建立了扁桃拟茎点霉的荧光定量PCR检测方法。结果发现,该方法只能特异识别扁桃拟茎点霉。检测灵敏度可达4×101copies·uL-1,比常规PCR检测方法高1 000倍;孢子检测最低限达2个孢子,比常规PCR检测方法高10倍,且仅需1 h即可完成检测。该方法用于田间样品检测,扁桃拟茎点霉的阳性检出率达86%,高于分离培养法和常规PCR检出结果。本研究建立的基于Taq Man探针的荧光定量PCR检测体系可用于田间对扁桃拟茎点霉的快速检测。