斜纹夜蛾蜕皮激素受体与超气门蛋白的原核表达及活性检测

编号 zgly0001421842

文献类型 期刊论文

文献题名 斜纹夜蛾蜕皮激素受体与超气门蛋白的原核表达及活性检测

作者 王涛  邱秀翠  焦艳艳  刘辉  刘永杰 

作者单位 山东农业大学植物保护学院 

母体文献 昆虫学报 

年卷期 2012年11期

年份 2012 

分类号 S482.3 

关键词 斜纹夜蛾  蜕皮激素受体  超气门蛋白  原核表达  放射性比活 

文摘内容 双酰基肼类杀虫剂模拟天然蜕皮激素作用影响幼虫蜕皮。昆虫蜕皮激素受体的高度敏感性和专一性要求必须建立新的杀虫活性检测技术,以适应快速准确和大批量筛选的要求。本研究采用RT-PCR技术,获取斜纹夜蛾Spodoptera litura蜕皮激素受体(EcR)与超气门蛋白(USP)功能域目的基因,构建EcR、USP功能区基因原核表达载体(pEHISEGFPTEV-EcRcde和pEHISEGFPTEV-USPcde)。载体经诱导表达和蛋白纯化,获得EcR和USP功能区纯化蛋白。在蛋白浓度l mg/mL,3H-PonA终浓度8 nmol/L的条件下,采用放射性配基受体结合分析测定了4种药剂(虫酰肼、呋喃虫酰肼、抑食肼和灭幼脲)不同浓度下的放射性比活的变化。结果显示:随着药剂浓度的逐渐增大,前3种药剂的放射性比活都有不同程度的降低,其中虫酰肼的放射性比活降低程度最大,其次是呋喃虫酰肼和抑食肼,灭幼脲的放射性比活基本无变化。这些结果表明相同条件下虫酰肼比呋喃虫酰肼和抑食肼有更高的杀虫活力,本研究的方法可对双酰基肼类杀虫剂或者先导化合物进行初步筛选。