侧翼序列克隆方法评价

编号 zgly0001316090

文献类型 期刊论文

文献题名 侧翼序列克隆方法评价

作者 洪登峰  万丽丽  杨光圣 

作者单位 华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室 国家油菜改良(武汉)中心  华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室  国家油菜改良(武汉)中心  武汉  430070 

母体文献 分子植物育种 

年卷期 2006年02期

年份 2006 

分类号 Q943.2 

关键词 侧翼序列  连接成环PCR  外源接头介导PCR  半随机引物PCR  T接头PCR  热不对称交错PCR  DNA步行—复性控制引物 

文摘内容 克隆已知序列的侧翼DNA区域是基因操作实验中经常面临的任务之一。自PCR技术发明以来,以其为基础克隆侧翼序列的方法不断开发,如反向PCR(inversePCR)、捕捉PCR(capturePCR)、VectorettePCR、抑制PCR(suppressionPCR)、T接头PCR(T-linkerPCR)、多功能接头PCR(versatilecassettePCR)、AluPCR、热不对称交错PCR(thermalasymmetricinterlacedPCR)和DNA步行—复性控制引物(DNAwalking-an-nealingcontrolprimerTM)等。本文对上述方法的原理进行了简要的概括和总结,据此将其归为三大策略,即连接成环PCR、外源接头介导PCR和半随机引物PCR。对不同的策略和同一策略中不同的方法的优缺点亦进行了比较,进而讨论和展望了它们的主要应用领域和潜力,以期对实际操作起到借鉴作用。